进行胃蛋白酶原的检测,主要的意义是判断是否正常,因为胃蛋白酶原忽高忽低,会影响到正常消化功能以及正常肠胃功能,对个人的身体造成的伤害相当大,所以在平时一定要注意,根据个人自身的情况选择治疗方法,检测方法,才能够判断出目前的病理状态。
测试方法取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1ml,另3支各精密加入供试品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保温5分钟,精密加入预热至37℃±0.5℃的血红蛋白试液5ml,摇匀,并准确计时,在37℃±0.5℃水浴中反应10分钟。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,摇匀,滤过,取续滤液备用。另取试管2支,各精密加入血红蛋白试液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保湿10分钟,
再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,其中1支加供试品溶液1ml,另1支加上述盐酸溶液1ml,摇匀,滤过,取续滤液,分别作为供试品和对照品的空白对照,照分光光度法(附录ⅣA)在275nm的波长处测定吸收度,算出平均值AS和A,按下式计算。
A×Ws×n 每1g含蛋白酶活力(单位)=As×W×10×181.19式中 AS为对照品的平均吸收度;A为供试品的平均吸收度;Ws为对照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W为供试品取样量,g;n为供试品稀释倍数。
在上述条件下,每分钟能催化水解血红蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量,为一个蛋白酶活力单位。
实验室方法名称: 胃蛋白酶的测定-胃蛋白酶测定法
应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。
本方法适用于胃蛋白酶。
方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。
试剂: 1. 血红蛋白试液
2. 三氟醋酸溶液
3. 盐酸溶液
仪器设备: 可见分光光度计
试样制备: 1. 供试品溶液的制备
精密称取本品适量,加盐酸溶液稀释制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,作为供试品溶液。
2. 对照品溶液的制备
精密称取酪氨酸对照品适量,加盐酸溶液稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。
注:"精密称取"系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。"精密量取"系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。